การพัฒนาวิธีอิไลซา สำหรับตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อ Burkholderia pseudomallei

ศราวุธ สุทธิรัตน์

Abstract


          พัฒนาวิธี ELISA เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อ Burkholderia pseudomallei โดยการหาสภาวะที่เหมาะสมด้วยการทำ checkerboard titration เมื่อทดสอบกับกลุ่มตัวอย่างผู้ป่วยและกลุ่มตัวอย่างควบคุมจำนวน 54 ตัวอย่าง โดยแบ่งเป็น 4 กลุ่มประกอบด้วย ผู้ป่วยโรคเมลิออยโดสิส 24 ตัวอย่าง ผู้ที่มีภูมิลำเนาในพื้นที่ระบาดภาคตะวันออกเฉียงเหนือ 10 ตัวอย่าง  ผู้ที่มีสุขภาพดีซึ่งไม่มีภูมิลำเนาในพื้นที่ระบาด 10 ตัวอย่าง และผู้ป่วยโรคอื่นที่ไม่ใช่เมลิออยโดสิส (syphilis, autoimmune, typhoid, mycoplasma, hepatitis B, hepatitis C, dengue fever และ hepatocellular carcinoma) 10 ตัวอย่าง  คำนวณค่า cut-off ได้ 0.21  พบผลบวกปลอมในกลุ่มตัวอย่างที่มีภูมิลำเนาในพื้นที่การระบาด 1 ตัวอย่าง แต่ไม่พบปฏิกิริยาข้ามกลุ่มกับโรคอื่นๆ เมื่อคำนวณค่าความไว ความจำเพาะ และประสิทธิภาพของวิธีทดสอบได้ร้อยละ 100, 96.7 และ 98.2 ตามลำดับ อย่างไรก็ตามวิธี ELISA ที่พัฒนาขึ้นนี้ แม้จะมีความไว และความจำเพาะสูง แต่ยังมีขั้นตอนที่ยุ่งยาก ไม่สะดวกในการนำไปใช้ภาคสนาม ซึ่งงานวิจัยนี้ควรจะพัฒนา ปรับปรุง และเพิ่มจำนวนตัวอย่างให้มากขึ้นเพื่อความน่าเชื่อถือของวิธีทดสอบต่อไป


Keywords


เมลิออยโดสิส; ELISA; checkerboard titration

Full Text:

PDF

References


Whitmore A, Krishnasmami CS. (1912). An account of the discovery of a hitherto undescribed infective disease occurring among the population of Rangoon. Indian. Med. Gaz. 47, 262-267.

Chambon L. (1955). Isolement du bacille de Whitmore a partir du mileu exterieur. Ann. Inst. Pasteur (Paris). 89, 229-35.

Miller WR, Pannell L, Cravitz L, Tanner WA, Ingalls MS. (1948). Studies on certain biological characteristics of Malleomyces mallei and Malleomyces pseudomallei. Morphology ,cultivation, viability and isolation from contaminated specimens. J. Bact. 55, 115-126.

Woo ML, Chan PS, French GL. (1987). A case of melioidosis presenting with prostatic abscess in Hong Kong. J.Urol. 137, 120-121.

Brundage WG, Thuss CJJ, Walden DC. (1968). Four fatal cases of melioidosis in U.S.soldiers in Vietnam. Bacteriologic and pathologic characteristics. Am.J.Trop.Med.Hyg. 17, 183-191.

Rubin HL, Alexander AD, Yager RH. (1963). Melioidosis a military medical problem ? Milit. Med. 128, 523-542.

สำนักระบาดวิทยา กรมควบคุมโรค กระทรวงสาธารณสุข. (2555). สรุปรายงานการเฝ้าระวังโรคประจำปี 2554. กรุงเทพฯ: โรงพิมพ์องค์การสงเคราะห์ทหารผ่านศึกในพระบรมราชูปถัมภ์.

Chantratita N, Wuthiekanun V, Thanwisai A, Limmathurotsakul D, Cheng AC, Chierakul W, Day NP, Peacock SJ. (2007). Accuracy of Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Using Crude and Purified Antigens for Serodiagnosis of Melioidosis. Clin Vaccine Immunol. 14(1), 110-3.

Chenthamarakshan V, Vadivelu J, Puthucheary SD. (2001). Detection of immunoglobulins M and G using culture filtrate antigen of Burkholderia pseudomallei. Diagn Microbiol Infect Dis. 39, 1-7.

Chuah SC, Gilmore G, Norton RE. (2005). Rapid serological diagnosis of melioidosis: an evaluation of a prototype immunochromatographic test. Pathology. 37(2), 169-171.

อิสยา จันทร์วิทยานุชิต และคณะ. (2553). แบคทีเรียทางการแพทย์ (พิมพ์ครั้งที่ 2). กรุงเทพฯ: สำนักพิมพ์แห่งจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย.

เพลินจันทร์ เชษฐ์โชติศักดิ์, วรรณพร วุฒิเอกอนันต์, วีระชัย โควสุวรรณ, สุภาภรณ์ พัวเพิ่มพูลศิริ, สุรศักดิ์ วงศ์รัตนชีวิน. (2547). โรคเมลิออยโดสิส (พิมพ์ครั้งที่ 1). กรุงเทพฯ: บริษัทโฮลิสติก พับลิชชิ่ง จำกัด.

Limmathurotsakul D, Chantratita N, Teerawattanasook N, Piriyagitpaiboon K, Thanwisai A, Wuthiekanun V, Day NP, Cooper B, Peacock SJ. (2011). Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the Diagnosis of Melioidosis: Better Than We Thought. Clin Infect Dis. 52(8), 1024-1028.

Dharakul T, Songsivilai S, Anuntagool N, Chaowagul W, Wongbunnate S, Intachote P, Sirisinha S. (1997). Diagnostic value of an antibody enzyme-linked immunosorbent assay using affinity-purified antigen in an area endemic for melioidosis. Am J Trop Med Hyg. 56(4), 418-423.

Wongratanacheewi S, Sermswan RW, Anuntagool N, Sirisinha S. (2001). Retrospective Study on the Diagnostic Value of IgG ELISA, Dot Immunoassay and Indirect Hemagglutination in Septicemic Melioidosis. Asian Pac J Allergy Immunol. 19, 129-133.

Phung LV, Han Y, Oka S, Hotta H, Smith MD, Theeparakun P, Yabuuchi E, Yano I. (1995). Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using a glycolipid antigen for the serodiagnosis of melioidosis. FEMS Immunol Med Microbiol. 12(3-4), 259-264.

Kunakorn M, Boonma P, Khupulsup K, Petchclai B. (1990). Enzyme-linked immunosorbent assay for immunoglobulin M specific antibody for the diagnosis of melioidosis. J Clin Microbiol. 28(6), 1249 –1253.

Ashdown LR, Johnson RW, Koehler JM, Cooney CA. (1989). Enzyme-linked immunosorbent assay for the diagnosis of clinical and subclinical melioidosis. J Infect Dis. 160(2), 253-260.


Refbacks

  • There are currently no refbacks.